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牛乳铁蛋白ELISA检测试剂盒

检测项目:优质乳工程

适用样本:生鲜奶、巴氏杀菌奶、奶粉

规格
96T/盒
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产品介绍
概述

乳铁蛋白(lactoferrinLF)是乳汁中一种重要的非血红素铁 结合糖蛋白,中性粒细胞颗粒中具有杀菌活性的单体糖蛋白。 乳铁蛋白不仅参与铁的转运,而且具有广谱抗菌、抗氧化、抗 癌、调节免疫系统等强大生物功能,被认为是一种新型抗菌、 抗癌药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂。 本试剂盒是应用 ELISA 技术研发的新一代牛乳铁蛋白检 测产品,操作时间仅需 25min,能最大限度地减少操作误差和 工作强度。

检测步骤

1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(2025℃)平 1 小时或 37℃温箱平衡 30min 以上,注意每种液体试剂 使用前均须完全溶解摇匀。

2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中 并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于 28℃。切勿 冷冻。?

3、洗涤工作液在使用前也需回温。

4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标 准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5、加标准品/样本:加牛乳铁蛋白酶标物 50μL/孔到对应的微 孔中,再加入标准品或样本 50μL/孔。轻轻振荡混匀,用 盖板膜盖板后置 37℃避光环境中反应 15min。?

6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液 250μL/ 孔,充分洗涤 4~5 次,每次间隔 10s,用吸水纸拍干(拍 干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。

7、显色:加入底物液 A 50μL/孔,再加入底物液 B 50μL/ 孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置 37℃避光环境中反 10min。?

8、测定:加入终止液 50μL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪 450nm 处(建议用双波长 450/630nm 检测,请在 5min 内读完数据),测定每孔 OD 值。

注意事项
1、试剂及样本没有回温到(20~25℃)会导致所有标准的 OD值偏低。 2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。 3、每加一种试剂前需将其摇匀。 4、反应终止液为 2M 硫酸,避免接触皮肤。 5、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。 6、储存条件 保存试剂盒于 2~8℃,不要冷冻,将不用的酶标板微孔板放进原锡箔袋中重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。 7、试剂变质的迹象 发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。1080ppb标准的吸光度(450/630nm)值小于 0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。 8、在加入底物液 A 液和底物液 B 液后,一般显色时间为10min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到 15min(或更长),但不得超过 20min。反之,则减短反应时间。 9、浓缩洗涤液及其他试剂组分出现结晶请加热(温度不超60℃)溶解后使用。 10、该试剂盒最佳反应温度为 37℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。
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